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一起来了解一下质粒载体的概念
浏览次数:144发布日期:2020-04-17
  质粒(Plasmid)是附加到细胞中的非细胞的染色体或核区DNA原有的能够自主复制的较小的DNA分子(即细胞附殖粒、又胞附殖粒)。大部分的质粒虽然都是环状构型,它存在于许多细菌以及酵母菌等生物中,乃至于植物的叶绿体和线粒体等胞器中。
 
  把一个有用的目的DNA片段通过重组DNA技术,送进受体细胞中去进行繁殖和表达的工具叫载体(Vector)。
 
  细菌质粒是重组DNA 技术中常用的载体。质粒分子本身是含有复制功能的遗传结构。质粒还带有某些遗传信息,所以会赋予宿主细胞一些遗传性状。其自我复制能力及所携带的遗传信息在重组DNA操作,如扩增、筛选过程中都是极为有用的。
 
  质粒载体是在天然质粒的基础上为适应实验室操作而进行人工构建的。与天然质粒相比,质粒载体通常带有一个或一个以上的选择性标记基因(如抗生素抗性基因)和一个人工合成的含有多个限制性内切酶识别位点的多克隆位点序列,并去掉了大部分非必需序列,使分子量尽可能减少,以便于基因工程操作。
 
  大多质粒载体带有一些多用途的辅助序列,这些用途包括通过组织化学方法肉眼鉴定重组克隆、产生用于序列测定的单链DNA、体外转录外源DNA序列、鉴定片段的插入方向、外源基因的大量表达等。
 
  一个理想的克隆载体大致应有下列一些特性:
 
  ⑴分子量小、多拷贝、松弛控制型;
 
  ⑵具有多种常用的限制性内切酶的单切点;
 
  ⑶能插入较大的外源DNA片段;
 
  ⑷具有两个以上的遗传标记物,便于鉴定和筛选。
 
  ⑸对宿主细胞无害。常用的质粒载体大小一般在1kb至10kb之间,如PBR322、PUC系列、PGEM系列、PET系列和pBluescript(简称pBS)等。
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